乳酸鏈球菌素(別名:乳酸鏈球菌肽或尼,Nisin)是從乳酸鏈球菌發(fā)酵產(chǎn)物中提取的一種 多肽類抗菌物質(zhì),是一種世界公認(rèn)的安全、天然生物食品防腐劑和抗菌劑。早在 1928 年, Rogers 和 Whittier 就發(fā)現(xiàn)乳酸鏈球菌的代謝產(chǎn)物能夠抑制部分革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(zhǎng)。1944 年 Mattick 和 Hirsch 發(fā)現(xiàn)血清學(xué) N 群中的一些乳酸鏈球菌能產(chǎn)生蛋白類抑菌物質(zhì),命名為N _inhibitory Substance 即N群抑菌物質(zhì),簡(jiǎn)稱為 Nisin。1951 年,Hirsch 等人應(yīng)用乳酸鏈球菌 素到食品保藏中,成功的抑制了由產(chǎn)氣梭狀芽孢桿菌引起的奶酪腐敗,極大改善了奶酪的品 質(zhì)。1953 年由英國(guó)的阿普林和巴雷特公司首次以商品的形式出售了這種新的防腐劑——乳酸鏈球菌素。1969 年,F(xiàn)AO/WHO 食品添加劑聯(lián)合專家委員會(huì)批準(zhǔn)乳酸鏈球菌素作為一種 生物型防腐劑應(yīng)用于食品工業(yè)。1988 年美國(guó)國(guó)家食品和藥物管理局(FDA)正式批準(zhǔn)將乳酸鏈 球菌素應(yīng)用于食品中。我國(guó)在 GB2760-86 中批準(zhǔn)乳酸鏈球菌素可用于罐藏食品、植物蛋白食品、乳制品、肉制品中。
迄今為止,乳酸鏈球菌素已在全世界 70 多個(gè)國(guó)家和地區(qū)被用作 防腐劑。
1 分子結(jié)構(gòu)
乳酸鏈球菌素分子由 34 個(gè)氨基酸殘基組成,分子式為 C143H228N42O37S7,分子量為 3510。經(jīng)過(guò)幾十年的研究,人們已發(fā)現(xiàn)乳酸鏈球菌素分子有 6 種類型,它 們分別是 A、B、C、D、E、Z,其中以 NisinA 和 Z 兩種類型的研究最為活躍。NisinA 與 NisinZ 的差異僅在于氨基酸順序上第 27 位氨基酸的種類不同。NisinA 是組氨酸(His),而 NisinZ 是天門(mén)冬酰胺(Asn)。資料表明,同樣濃度下 NisinZ 的溶解度和抗菌能力都比 NisinA 強(qiáng)。
2 溶解性
乳酸鏈球菌素(Nisin)是一種白色至淺棕色固體粉末,使用時(shí)需溶于水或液體中,要 取決于溶液的 pH 值,在 pH 值較低的情況下,溶解性較好。如在水中(pH=7),溶解度為 49.0mg/mL(乳酸鏈球菌素);若在 0.02M 鹽酸中,溶解度為 118.0mg/mL(乳酸鏈球菌素); 在堿性條件下,幾乎不溶解,所以在應(yīng)用時(shí),一般先用 0.02M鹽酸溶解,再加入到食品中。
3 穩(wěn)定性
乳酸鏈球菌素(Nisin)的穩(wěn)定性主要取決于溫度、pH值、酶、基質(zhì)等因素。在酸性條件下呈現(xiàn)最大的穩(wěn)定性,隨著 pH 的升高其穩(wěn)定性大大降低。在 pH2.0 的條件下耐受 121℃ 長(zhǎng)達(dá) 30min。pH 值越高,本品表現(xiàn)越不穩(wěn)定,同是在 121℃下加熱 15min,pH4.0 條件下活 性降低 29%,到 pH 值變?yōu)?7.0 時(shí),喪失掉 99.7%的抑菌活性。在一定溫度范圍內(nèi),隨著溫 度的升高,它的活性喪失增加。對(duì)α-凝乳蛋白酶、胰腺酶、消化酶、唾液酶等很敏感,但 對(duì)粗制凝乳蛋白酶、脂酶、淀粉酶不敏感。當(dāng)乳酸鏈球菌素加入到食品中,則受到介質(zhì)的保 護(hù),一些大分子食物如牛奶,肉湯等可使其穩(wěn)定性大大增強(qiáng)。此外本品的穩(wěn)定性還與熱處理 條件以及貨架期長(zhǎng)短等因素有關(guān)。
4 有效性
4.1 抗菌譜
乳酸鏈球菌素對(duì)許多革蘭氏陽(yáng)性菌及其芽孢有強(qiáng)烈的抑制作用,如葡萄球菌 (Staphylooccus)、鏈球菌(Streptococcus)、微球菌(Micrococcus)、分枝桿菌(Mycobacterium)、 李斯特氏菌(Listeria)和乳桿菌(Lactobacillus)等。早期的研究認(rèn)為本品對(duì)革蘭氏陰性菌無(wú)抑制 作用,但近期研究表明,在螯合劑如 EDTA 存在下可以抑制沙門(mén)氏菌(Salmonellasp spp.),大 腸桿菌(Escherichia coli)和銅綠假單胞菌(Pseudomonsa aeruginosa)等革蘭氏陰性菌。新型的食 品冷凍防腐技術(shù)如經(jīng)超高流體靜壓力(Ultra high hydrostatic pressure,UHP)和脈沖電場(chǎng)技術(shù) (Pulsed electric field,EP)也可以使大腸桿菌和鼠傷寒沙門(mén)氏菌對(duì)本品敏感。本品對(duì)霉菌、酵 母沒(méi)有抑制作用,但對(duì)利用酵母代謝產(chǎn)物的細(xì)菌卻有很好的抑制作用。
4.2 作用機(jī)理
乳酸鏈球菌素可以引起敏感菌細(xì)胞質(zhì)的釋放,從而造成細(xì)胞裂解。乳酸鏈球菌素對(duì)微生 物的作用首先是乳酸鏈球菌素對(duì)細(xì)胞膜的吸附,在此過(guò)程中,乳酸鏈球菌素能否通過(guò)細(xì)菌細(xì) 胞壁是一個(gè)關(guān)鍵因素。同時(shí),其它如 pH、Mg2+濃度、乳酸濃度、氮源種類等均可影響乳酸 鏈球菌素對(duì)細(xì)胞的吸附作用。帶有正電荷的乳酸鏈球菌素吸附在膜上后,利用離子間相互作 用,及其分子的 C 末端、N 末端對(duì)膜結(jié)構(gòu)產(chǎn)生作用,形成穿膜“孔道”,從而引起胞內(nèi)物質(zhì) 泄漏,細(xì)胞解體死亡。
4.3 改善食品品質(zhì) 鮮乳采用 135℃、2 秒鐘超高溫瞬時(shí)滅菌,非芽孢細(xì)菌的死亡率為 100%,芽孢細(xì)菌的 死亡率 90%,還有 10%的芽孢細(xì)菌不能殺滅。若鮮乳中添加 0.03-0.05g/kg 乳酸鏈球菌素就 可抑制芽孢桿菌和梭狀芽孢桿菌孢子的發(fā)芽和繁殖。世界上有不少國(guó)家如英、法、澳大利亞 等,在包裝食品中添加乳酸鏈球菌素(Nisin),通過(guò)此法可以降低滅菌溫度,縮短滅菌時(shí)間, 降低熱加工溫度,減少營(yíng)養(yǎng)成份的損失,改進(jìn)食品的品質(zhì)和節(jié)省能源,并能有效地延長(zhǎng)食品 的保藏時(shí)間。
5 安全性
乳酸鏈球菌素是一種多肽,可被人體內(nèi)的胰凝乳蛋白酶降解成氨基酸,因而不會(huì)在體內(nèi) 殘留,也不會(huì)改變腸道正常菌群或造成體內(nèi)致病菌的抗藥性??咕亟徊婵剐匝芯勘砻鞅酒?與其他抗菌素如青霉素、鏈霉素、紅霉素等無(wú)交叉抗性。目前已進(jìn)行的生物學(xué)特性研究包括 毒性、致癌性、存活性、再生性、血液化學(xué)、腎功能、腦功能、應(yīng)激反應(yīng)及動(dòng)物器官病毒學(xué) 等,都證明是安全的。
可以取代或部分取代化學(xué)防腐劑、發(fā)色劑(如亞硝酸鹽),以滿足生產(chǎn)保健食品、綠色 食品的需要。
6 主要應(yīng)用領(lǐng)域
可廣泛應(yīng)用于肉制品、乳制品、罐頭、海產(chǎn)品、飲料、果汁飲料、液體蛋及蛋制品、調(diào) 味品、釀酒工藝、烘焙食品、方便食品、香基香料、化妝品領(lǐng)域等中。